一、原理

　　单向琼脂扩散实验又称单向免疫扩散实验。指可溶性抗原在相应抗体的琼脂介质中的扩散，可定性、定量抗原。

　　二、操作步骤

　　1.取一块干净的玻璃板，用少量75%乙醇冲洗，晾干后置于水平台，将1%琼脂糖融化，56℃水浴中保温。

　　2.取15ml琼脂糖加到56℃预热玻璃管中，加入约200微升抗血清，充分混匀后铺于玻璃板上，厚度约为1㎜。

　　3.待凝胶凝固后打孔，直径为3㎜，将孔内琼脂弄出。

　　4.将系列稀释的标准抗原和待检抗原分别加到凝胶孔内，每孔5微升。

　　将凝胶板置于湿盒内，室温过夜，观察结果。

　　三、实验结果

　　发现沉淀环的大小与抗原的浓度成反比，基本成线性相关。其大小不仅与孔中抗原的浓度相关，而且和琼脂中抗体的浓度有关。