呋塞米属高效利尿剂,作用于髓绊升枝粗段的皮质与髓质部,抑制Cl-的主动转运及Na+的被动重吸收,发挥强大的利尿作用.

　　【目的】

　　观察呋塞米对小白鼠的利尿作用及对电解质排泄的影响.

　　【原理】

　　呋塞米属高效利尿剂,作用于髓绊升枝粗段的皮质与髓质部,抑制Cl-的主动转运及Na+的被动重吸收,发挥强大的利尿作用;钠钾金属离子经火焰激发后,可发出特异的光谱,钠受激发后发出黄光,波长为589 nm,钾则呈红色,波长767 nm.溶液中金属离子浓度越高,发射的光越强,两者呈正比关系.利用相应的滤光技术、光电检流仪可测定相应光的强度. 根据标准液离子浓度可计算出样品中离子浓度(需要相应的滤波片),这是火焰光度计的工作原理.

　　【实验材料】

　　1、动物:小白鼠 20—25g

　　2、药品:1% 呋塞米,生理盐水

　　3、器材:小鼠代谢笼,注射器,烧杯,量筒,6410火焰光度计

　　4、标准液的配制:

　　钠标准贮存液(100 mEq/L)的配制:精确称取干燥的氯化钠5.843 g,以去离子水稀释至1000 mL.

　　钾标准贮存液(10 mEq/L)的配制:精确称取干燥的氯化钾0.7456 g,以去离子水稀释至1000 mL.

　　钠、钾应用标准液(钠 1.4 mEq/L,钾 0.04 mEq/L)的配制:取上述钠贮存液14 mL,钾贮存液4 mL,混匀后用去离子水稀释至1000 mL.

　　【方法与步骤】

　　1、将动物随机分为两组: 给药组及生理盐水对照组, 每组取10 只小白鼠.

　　2、试验前给每只小白鼠水负荷——每只生理盐水 0.5 mL/10g灌胃,20分钟后给药组每只动物给予1% 呋塞米 0.1 mL/10g ip, 对照组给予等容量的生理盐水. 注射后立即将小白鼠放入代谢笼,收集30 min尿量.

　　【尿钠、尿钾的测定】

　　1、仪器准备:调整火焰光度计,使其处于工作状态.

　　2、标本稀释:取尿液0.1 mL,去离子水9.9 mL,将尿液用去离子水稀释100倍.

　　3、标本测定:先用去离子水调节零点,然后测标准液,得到标准液的离子浓度读数,即[Na+]、[K+]分别为140 mmol/l、4mmol/l.最后测待测样品,直接读出尿钠、钾的浓度.测定结束后,以去离子水冲洗管道,关机.

　　【结果与处理】

　　1、按下式计算用呋塞米后排钠量及排钾量:

　　排出量(毫克)=所测离子读数(毫摩尔/升)′ 尿量(升)′ 分子量 ′ 稀释倍数

　　2、制作表格比较给药组、对照组动物在尿量、排钠、排钾量上的区别.